Spektralphotometrie, Zweig der Spektroskopie, der sich mit der Messung der von einem Körper transmittierten oder reflektierten Strahlungsenergie als Funktion der Wellenlänge befasst. Normalerweise wird die Intensität der übertragenen Energie mit derjenigen verglichen, die von einem anderen System übertragen wird, das als Standard dient. Verschiedene Arten von modernen Spektralphotometern decken breite Bereiche des elektromagnetischen Spektrums ab: Röntgen, Ultraviolett, sichtbar, Infrarot oder Mikrowelle.
Zwei Gesetze drücken die Beziehung zwischen der Absorption von Strahlungsenergie und dem absorbierenden Medium aus. Nach Bouguers (oder Lamberts) Gesetz absorbiert jede Schicht gleicher Dicke des Mediums einen gleichen Bruchteil der Energie, die es durchquert. Nach dem Gesetz von Beer ist die Absorptionskapazität einer gelösten Substanz direkt proportional zu ihrer Konzentration in einer Lösung.
Die Ultraviolettspektrophotometrie ist besonders nützlich, um farblose Substanzen in Lösung nachzuweisen und ihre Konzentration zu messen. Die Infrarotspektrophotometrie wird am häufigsten zur Untersuchung der molekularen Strukturen komplexer organischer Verbindungen verwendet.