Hirschfliegen legen zwischen 100 und 800 Eier in Chargen auf Vegetation in der Nähe von Wasser oder Feuchtigkeit. Während des Larvenstadiums, das ein bis drei Jahre dauert, ernähren sie sich von kleinen Kreaturen oder verrottenden organischen Stoffen in der Nähe oder im Wasser. Nach einem Puppenstadium treten sie im späten Frühjahr und Sommer als Erwachsene auf. Während männliche Hirschfliegen Pollen sammeln, ernähren sich weibliche Hirschfliegen von Blut, das sie zur Eierproduktion benötigen. Weibchen ernähren sich hauptsächlich von Säugetieren. Sie werden von Beute durch Anblick, Geruch oder den Nachweis von Kohlendioxid angezogen. Andere Lockstoffe sind Körperwärme, Bewegung, dunkle Farben und Lichter in der Nacht. Sie sind aktiv unter direkter Sonneneinstrahlung und Stunden, wenn die Temperatur über 22 ° C (71,6 °). Beim Füttern verwenden die Weibchen scherenartige Unterkiefer und Oberkiefer, um einen kreuzförmigen Einschnitt zu machen und dann das Blut aufzuwickeln. Ihr Biss kann schmerzhaft sein. Antikoagulantien im Speichel der Fliege verhindern die Blutgerinnung und können schwere allergische Reaktionen hervorrufen. Parasiten und Krankheiten, die von der Hirschfliege übertragen werden, umfassen Tularämie, Milzbrand, Anaplasmose, infektiöse Anämie bei Pferden, Schweinecholera und Filiariose. DEET ist kein wirksames Repellent.

Raubtiere der Hirschfliege (und anderer Tabanidae) sind nestbauende Wespen und Hornissen, Libellen und einige Vögel, einschließlich der Killdeer. Sie können vom Menschen nicht kontrolliert werden, da Insektizide in den empfindlichen Feuchtgebieten, in denen sich die Larven normalerweise entwickeln, nicht angewendet werden können. Darüber hinaus haben Erwachsene möglicherweise eine erhebliche Entfernung von dem Ort entwickelt, an dem die Eier gelegt wurden. Fanggeräte und Schutzkleidung wie langärmelige Hemden und Hüte können dazu beitragen, den Ärger und die Bisse aggressiver Hirschfliegen zu vermeiden.