Quando o mínimo limiar renal para a hemoglobina do sangue é excedidos, é observado um depósito de ferro de coloração do pigmento do epitélio do renal complicado túbulos. Em um certo ponto este epitélio não pode absorver mais hemoglobina e isso coincide com o nível mínimo de limiar renal. Quando as injecções de hemoglobina no sangue são mantidas abaixo do limiar renal mínimo, notamos uma ausência completa de pigmento de coloração de ferro no epitélio tubular renal. Dado um depósito de pigmento de coloração de ferro no epitélio tubular, ele vai desaparecer lentamente durante os períodos de repouso sem injeções de hemoglobina. Anemia devido a sangramento irá acelerar esta remoção de pigmento do epitélio renal e isso indica uma conservação de material pelo rim para uso na construção de Nova hemoglobina. Pigmento que dá uma mancha positiva para o ferro será encontrado no fígado e baço quando as injecções de hemoglobina são dadas, independentemente do limiar renal. A remoção deste pigmento é acelerada por anemia devido a hemorragia e, como regra, um período de anemia de 2 meses em um nível de 1/3 normal (40 a 50 por cento de hemoglobina) irá tornar o baço, fígado e rim livre de pigmento de coloração de ferro. Pigmento que provoca uma mancha positiva de ferro é frequentemente observado nas glândulas linfáticas mesentéricas e retroperitoneais inferiores. Esta é apenas uma drenagem de pigmentos e fagócitos, incluindo pigmentos de algum órgão em que o depósito de pigmento era primário. Em animais de reserva neste laboratório o nível de hemoglobina é bastante elevado quando os animais estão em um estado perfeitamente normal. A hemoglobina sanguínea tem uma média de 120 a 150 por cento de hemoglobina. Em tais cães pigmento de coloração de ferro no baço é um achado comum e, por vezes, é observado no fígado. Para estabelecer uma linha de base precisa para o estudo do armazenamento de pigmento de ferro e ferro de coloração devido à ingestão de dieta deve-se submeter estes cães a um período preliminar de anemia de pelo menos 2 meses. A hemoglobina muscular tem um limiar renal muito baixo e escapa livremente para a urina quando administrada por via intravenosa. Contrastando com a hemoglobina sanguínea esta hemoglobina de musde em condições idênticas não causa o depósito de pigmento de coloração de ferro dentro do epitélio dos túbulos renais. Um pigmento que não provoca qualquer reacção de coloração de ferro pode ser encontrado no epitélio dos túbulos convolutos do rim. Se isso é devido à dieta ou outros fatores é incerto, mas isso indica a conservação do pigmento pelo rim. Finalmente, gostaríamos de enfatizar novamente o fato de que o rim é de considerável importância na conservação da hemoglobina e da Divisão de hemoglobina produtos que presumivelmente são utilizados para construir nova hemoglobina.