under sina år som läkare Michaelis och en vän (Peter Rona) byggde ett kompakt laboratorium på sjukhuset och under fem år – Michaelis publicerades framgångsrikt över 100 gånger. Under sin forskning på sjukhuset var han den första som såg de olika typerna av hämning; specifikt med fruktos och glukos som hämmare av maltasaktivitet. Maltas bryter maltos i två enheter av antingen glukos eller fruktos. Resultat från det experimentet möjliggjorde divergensen av icke-konkurrenskraftig och konkurrenskraftig hämning. Icke-konkurrerande hämning påverkar kcat-värdet (men inte Km) på en given graf; denna hämmare binder till en plats som har specificitet för den specifika molekylen. Michaelis bestämde att när Hämmaren är bunden skulle enzymet inaktiveras.liksom många andra forskare i sin tid arbetade Leonor Michaelis och Maud Menten på en reaktion som användes för att ändra konformationen av sackaros och göra den lyse i två produkter – fruktos och glukos. Enzymet som är involverat i denna reaktion kallas invertas, och det är enzymet vars kinetik har stödts av Michaelis och Menten för att vara revolutionerande för kinetiken hos andra enzymer. Medan de uttryckte hastigheten för den studerade reaktionen, härledde de en ekvation som beskrev hastigheten på ett sätt som föreslog att den mestadels är beroende av enzymkoncentrationen, liksom på närvaron av substratet, men endast i viss utsträckning.

Adrian Brown och Victor Henri lade grunden för de upptäckter inom enzymkinetik som Michaelis och Menten är kända för. Brown föreställde sig teoretiskt den mekanism som nu accepterades för enzymkinetik, men hade inte de kvantitativa uppgifterna för att göra anspråk. Victor Henri gjorde betydande bidrag till enzymkinetik under sin doktorsavhandling, men han saknade att notera vikten av vätejonkoncentration och mutarotation av glukos. Målet med Henris avhandling var att jämföra hans kunskaper om enzymkatalyserade reaktioner på de erkända lagarna inom fysikalisk kemi. Henri krediteras för att vara den första som skriver ekvationen som nu kallas Michaelis-Menten ekvationen. Med hjälp av glukos och fruktos i de katalytiska reaktionerna kontrollerade av Maltas och invertas var Leonor Michaelis den första forskaren som skilde de olika typerna av hämning genom att använda pH-skalan som inte fanns i Henris tid.speciellt under sitt arbete med att beskriva hastigheten för denna reaktion testade och extrapolerade de också tanken på en annan forskare, Victor Henri, att enzymet de använde hade viss affinitet för båda produkterna av denna reaktion – fruktos och glukos. Med hjälp av Henris metoder perfekterade Michaelis och Menten nästan detta koncept av initialhastighetsmetod för steady-state-experiment. De studerade hämning när de fann att icke-konkurrenskraftig (blandad) hämning kännetecknas av dess effekt på kcat (katalysatorhastighet) medan konkurrens kännetecknas av dess effekt på hastighet (V). I Michaelis-och Menten-experimenten fokuserade de starkt på Ph-effekter av invertas med vätejoner. Invertas är ett enzym som finns i extracellulär jäst och katalyserade reaktioner genom hydrolys eller invertera en sackaros (blandning av sackaros och fruktos) till ”invertera socker.”Den främsta anledningen till att använda invertas var att det lätt kunde analyseras och experiment kunde göras på snabbare sätt. Sackaros roterar i polarimeter som dextroratatory-D medan invertsocker är levorotatory-L. Detta gjorde spårning av inversionen av socker relativt enkelt. De fann också att Kubi-D-glukos frisätts i reaktioner som katalyseras av invertas, vilket är mycket instabilt och spontant förändras till Kubi-D-glukos. Även om dessa båda är i dextroratatorisk form, är det här de noterade att glukos kan förändras spontant, även känd som mutarotation. Att inte ta hänsyn till detta var en av de främsta anledningarna till att Henris experiment blev korta. Genom att använda invertas för att katalysera sackarosinversion kunde de se hur snabbt enzymet reagerade genom polarimetri; därför befanns icke-konkurrerande hämning uppträda i reaktionen där sackaros inverterades med invertas.