orvosként és barátként töltött évei alatt (Peter Rona) épített egy kompakt labort a kórházban, és öt év alatt – Michaelis több mint 100 alkalommal jelent meg sikeresen. A kórházban végzett kutatásai során ő volt az első, aki a különböző típusú gátlásokat vizsgálta; konkrétan fruktózt és glükózt használt a maltázaktivitás gátlóiként. A maltáz a maltózt két egység glükózra vagy fruktózra bontja. A kísérlet eredményei lehetővé tették a nem versenyképes és versenyképes gátlás eltérését. A nem versenyképes gátlás a kcat értékét (de nem a Km-t) egy adott grafikonon befolyásolja; ez az inhibitor egy olyan helyhez kötődik, amely specifikussággal rendelkezik az adott molekulára. Michaelis megállapította, hogy amikor az inhibitor kötődik, az enzim inaktiválódik.
mint koruk sok más kutatója, Leonor Michaelis és Maud Menten olyan reakción dolgoztak, amelyet a szacharóz konformációjának megváltoztatására használtak, és két termékké – fruktózra és glükózra-tették. Az ebben a reakcióban részt vevő enzimet invertáznak nevezik, és ez az enzim, amelynek kinetikáját a Michaelis és a Menten támogatta, forradalminak bizonyult más enzimek kinetikája szempontjából. A vizsgált reakció sebességének kifejezése közben olyan egyenletből származtak, amely a sebességet oly módon írta le, amely azt sugallta, hogy leginkább az enzimkoncentrációtól, valamint a szubsztrát jelenlététől függ, de csak bizonyos mértékig.
Adrian Brown és Victor Henri megalapozták a Michaelis és Menten által ismert enzimkinetika felfedezéseit. Brown elméletileg elképzelte az enzim kinetikára elfogadott mechanizmust, de nem rendelkezett a kvantitatív adatokkal ahhoz, hogy igényt nyújtson be. Victor Henri doktori disszertációja során jelentős mértékben hozzájárult az enzimkinetikához, azonban nem vette figyelembe a hidrogénion-koncentráció és a glükóz mutarotációjának fontosságát. Henri dolgozatának célja az volt, hogy összehasonlítsa az enzimkatalizált reakciókkal kapcsolatos tudását a fizikai kémia elismert törvényeivel. Henri jóvá, hogy az első, hogy írja az egyenlet, amely ma ismert, mint a Michaelis-Menten egyenlet. A maltáz és invertáz által szabályozott katalitikus reakciókban a glükóz és a fruktóz felhasználásával Leonor Michaelis volt az első tudós, aki a különböző gátlási típusokat a Henri idejében nem létező pH-skála alkalmazásával különböztette meg.
különösen a reakció sebességének leírására irányuló munkájuk során tesztelték és extrapolálták egy másik tudós, Victor Henri ötletét is, hogy az általuk használt enzim némi affinitást mutat a reakció mindkét termékéhez-fruktóz és glükóz. Henri módszereivel Michaelis és Menten majdnem tökéletesítette ezt a kezdeti sebesség módszer fogalmát az egyensúlyi állapotú kísérletekhez. A gátlást tanulmányozták, amikor azt találták, hogy a nem versenyképes (vegyes) gátlást a kcat (katalizátor sebesség) hatása jellemzi, míg a versenyképességet a sebességre (V) gyakorolt hatása jellemzi. A Michaelis és Menten kísérletekben erősen az invertáz pH-hatásaira koncentráltak hidrogénionokkal. Az invertáz az extracelluláris élesztőben található enzim, amelyet hidrolízissel vagy szacharóz (szacharóz és fruktóz keveréke) “invertcukor” – ra történő megfordításával katalizálnak.”Az invertáz használatának fő oka az volt, hogy könnyen meghatározható, a kísérleteket pedig gyorsabb módon lehet elvégezni. A szacharóz polariméterben dextroratory-D-ként forog, míg az invertcukor levorotatory-L. Ez viszonylag egyszerűvé tette a cukor inverziójának nyomon követését. Azt is megállapították, hogy az α-d-glükóz olyan reakciókban szabadul fel, amelyeket nagyon instabil invertáz katalizál, és spontán módon változik a β-d-glükózra. Bár ezek mind a dextroratációs formában vannak, itt megjegyezték, hogy a glükóz spontán megváltozhat, más néven mutarotáció. Ennek figyelmen kívül hagyása volt az egyik fő oka annak, hogy Henri kísérletei elmaradtak. Az invertáz alkalmazásával a szacharóz inverziójának katalizálására láthatták, hogy az enzim milyen gyorsan reagál polarimetriával; ezért nem kompetitív gátlást találtak abban a reakcióban, ahol a szacharózt invertázzal megfordították.