Beschreibung

Das Thermo Scientific Pierce F(ab‘)2 Preparation Kit verwendet immobilisierte Pepsinprotease, um selektiv ganze menschliche und andere IgG-Antikörper zu verdauen, um F(ab‘)2-Fragmente herzustellen, die die Antigenbindungsaktivität beibehalten.
Merkmale der F (ab‘)2 Micro Vorbereitung Kit:
* Enzymfreie Verdauungsprodukte – Immobilisiertes Pepsin (Perlagaroseharz) sorgt für die Kontrolle der Verdauungsreaktion und die vollständige Entfernung der resultierenden Antikörperfragmente aus dem proteolytischen Enzym
• Geeignet für menschliche und andere IgG—Spezies – Das Kit-Verfahren ist für menschliches, Kaninchen- und Maus-IgG optimiert. Pepsin-basierte Verdauung ist für andere Spezies und Unterklassen von IgG wirksam, obwohl der Reinigungsschritt erfordert, dass der Antikörper effektiv an Protein A bindet. (Hinweis: Für beste Ergebnisse mit Maus-IgG1 verwenden Sie Teilenummer 44980.)
• Komplett—Kits enthalten alle Reagenzien, die zur Herstellung und Reinigung von Antikörperfragmenten benötigt werden
• Das Fast—Spin—Format reduziert die Probenverarbeitungszeit erheblich
• Flexibel- Protokolle sind für mehrere Spezies und IgG-Unterklassen sowie für Probengröße und -konzentration enthalten.
• Effizient- verbesserte Ausbeute und Probenreinheit
Diese F(ab‘)2-Präparationskits eignen sich für Menschen, Kaninchen, Mäuse und andere Arten und Unterklassen von IgG mit Ausnahme von Maus-IgG1. Die Antikörperverdauungsreaktion mit Pepsinagarose wird in praktischen Einweg-Spinsäulen durchgeführt, die eine effiziente Entfernung der immobilisierten Protease und eine maximale Rückgewinnung der IgG-Fragmente ermöglichen. In den Kits sind auch Thermo Scientific NAb Protein A Spinsäulen und Puffer enthalten, um die resultierenden Fragmente effizient zu reinigen. Protein A bindet die Fc-Fragmente und unverdautes IgG, so dass die reinen F (ab‘) 2 -Fragmente in der Durchflussfraktion zurückgewonnen werden können. Die Kits enthalten auch Thermo Scientific Zeba-Entsalzungsspinsäulen zur schnellen Vorbereitung der IgG-Probe ohne Verdünnung, anstatt zeitaufwändige Dialyseschritte zu verwenden.
Die Kits verwenden Pepsin, eine unspezifische Endopeptidase, um den Fc-Anteil des gesamten IgG enzymatisch zu verdauen und das als F(ab‘) 2 bekannte Fragment zu erhalten. Dieses Fragment besteht aus einem Paar von Fab ‚-Einheiten, die durch zwei Disulfidbindungen verbunden sind. Da die Pepsinprotease in immobilisierter Form als Agaroseharz zugeführt wird, wird die Verdauungsreaktion leicht gestoppt, indem das Harz aus der IgG-Lösung entfernt wird; das Ergebnis sind Verdauungsprodukte, die enzymfrei sind.
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