Při minimální renální práh pro krevní hemoglobin je překročena tam je pozorován vklad železa barvení pigmentu v epitelu semenotvorných tubulů ledvin. V určitém okamžiku tento epitel nemůže zabírat více hemoglobinu, což se shoduje s minimální renální prahovou hladinou. Když jsou injekce hemoglobinu v krvi udržovány pod minimální prahovou hladinou ledvin, zaznamenáváme úplnou nepřítomnost pigmentu barvení železa v renálním tubulárním epitelu. Vzhledem vklad železa barvení pigment v tubulární epitel, bude to pomalu mizí při odpočinku bez hemoglobinu injekce. Anémie způsobená krvácením urychlí toto odstranění pigmentu z renálního epitelu, což naznačuje zachování materiálu ledvinami pro použití při konstrukci nového hemoglobinu. Pigment, který dává pozitivní skvrnu na železo, se objeví v játrech a slezině, když se podávají injekce hemoglobinu, bez ohledu na renální prah. Odstranění tohoto pigmentu je urychlen anémie v důsledku krvácení a zpravidla je anémie dobu 2 měsíců na úrovni 1/3 normální (40 až 50 procent hemoglobinu) bude činit sleziny, jater a ledvin zdarma z železa barvení pigment. Pigment poskytující pozitivní skvrnu železa je často pozorován v mezenterických a dolních retroperitoneálních lymfatických žlázách. Jedná se pouze o drenáž pigmentu a fagocytů včetně pigmentu z nějakého orgánu, ve kterém byl pigmentový depozit primární. U psů v této laboratoři je hladina hemoglobinu poměrně vysoká, když jsou zvířata v naprosto normálním stavu. Krevní hemoglobin je v průměru 120 až 150 procent hemoglobinu. U takových psů je barvicí pigment železa ve slezině běžným nálezem a příležitostně je pozorován v játrech. Pro stanovení přesné základní linie pro studium ukládání pigmentu pro barvení železa a železa v důsledku příjmu stravy je třeba tyto psy podrobit předběžnému období anémie nejméně 2 měsíce. Svalový hemoglobin má velmi nízký renální práh a při intravenózním podání volně uniká do moči. Na rozdíl od krevního hemoglobinu tento musde hemoglobin za stejných podmínek nezpůsobuje ukládání pigmentu barvení železa v epitelu renálních tubulů. V epitelu spletitých tubulů ledvin lze nalézt pigment, který nevyvolává reakci na barvení železa. Zda je to způsobeno dietními nebo jinými faktory, je nejisté, ale to naznačuje zachování pigmentu ledvinami. Na závěr bychom znovu zdůraznit skutečnost, že ledviny má značný význam v ochraně hemoglobinu a hemoglobinu rozdělit produkty, které pravděpodobně jsou využity k vybudování nového hemoglobinu.