Stanol / Sterol Ester zawierający żywność i poziom cholesterolu we krwi

Tło

we wczesnych latach 1950-tych zaobserwowano, że sterole pochodzenia roślinnego zmniejszają poziom cholesterolu w surowicy.Dawka skuteczna u ludzi podawana w dawkach podzielonych wynosiła od 5 do 10 g/dobę. Wkrótce potwierdzono skuteczność steroli roślinnych w odniesieniu do obniżania poziomu cholesterolu we krwi,3456, choć w nieco niższych dawkach.Na podstawie tych danych sterole roślinne były krótko stosowane w obniżaniu poziomu cholesterolu we krwi przed wprowadzeniem leków farmakologicznych o wyższej skuteczności i akceptacji pacjenta. Odrodzenie zainteresowania sterolami pochodzenia roślinnego jest teraz połączone z włączaniem tych związków do żywności zawierającej tłuszcze. Nowsze dowody wykazały, że estryfikacja tych steroli zwiększa ich rozpuszczalność w tłuszczu i ich skuteczność w obniżaniu poziomu cholesterolu lipoprotein o niskiej gęstości (LDL).89

czym są sterole pochodzenia roślinnego?

sterole stanowią grupę związków, które są alkoholowymi pochodnymi cyklopentanoperhydrofenantrenu i są niezbędnym składnikiem błon komórkowych u zwierząt i roślin. Cholesterol jest sterolem komórek ssaków, podczas gdy wiele steroli lub fitosteroli jest wytwarzanych przez rośliny, przy czym sitosterol, kampesterol i stigmasterol są najczęściej spotykane. Sterole roślinne, choć strukturalnie podobne do cholesterolu, nie są syntetyzowane przez organizm ludzki. Są one bardzo słabo wchłaniane przez ludzkie jelita. Specyficzne sterole roślinne, które są obecnie włączane do żywności przeznaczonej do obniżania poziomu cholesterolu we krwi, są ekstrahowane z oleju sojowego lub oleju wysokiego (sosnowego). Dodatkowe źródła steroli roślinnych mogą być dostępne w najbliższej przyszłości. Sterole roślinne obecnie włączone do żywności są estryfikowane do nienasyconych kwasów tłuszczowych (tworząc estry steroli) w celu zwiększenia rozpuszczalności w lipidach, umożliwiając w ten sposób maksymalne włączenie do ograniczonej ilości tłuszczu. Niektóre dostępne obecnie sterole roślinne są nasycone, tworząc pochodne stanolu, sitostanol i kampestanol, które po estryfikacji tworzą estry stanolu.

wpływ tłuszczów zawierających sterole roślinne na poziom lipidów we krwi

na początku lat 90. odnotowano, że ester sitostanolu (3.4 g/d) dostarczona w postaci margaryny na bazie oleju rzepakowego (rzepakowego) obniżyła poziom cholesterolu LDL o ≈10% u osób o umiarkowanej hipercholesterolemii, a osoby z allelami Apolipoprotein (apo) E4, o których wcześniej informowano, że mają najwyższą skuteczność wchłaniania cholesterolu, odniosły największe korzyści z leczenia.Późniejsze prace wykazały, że maksymalna skuteczność w odniesieniu do obniżenia stężenia cholesterolu całkowitego i cholesterolu LDL jest osiągana przy ≈2 G/d oraz że wpływ na stężenie cholesterolu lub trójglicerydów lipoprotein o wysokiej gęstości (HDL) jest niewielki lub nie ma żadnego wpływu.101112131415161718192021 ponadto badania te wykazały, że spożywanie tłuszczów zawierających estry steroli pochodzenia roślinnego jest skuteczne zarówno u osób normolipidemicznych, jak i dyslipidemicznych, w tym u osób leczonych inhibitorami reduktazy β-hydroksy-β-metyloglutarylokoenzymu a (HMG-CoA) i innymi środkami zmniejszającymi stężenie lipidów. Ponadto, dzienne spożycie 1,8 do 3 g estrów stanolu roślinnego u dzieci hipercholesterolemicznych zmniejszało poziom cholesterolu LDL w stopniu podobnym do tego u dorosłych.22 w przeważającej części stwierdzono, że spożycie ≈2 g/d estru sterolu roślinnego obniża poziom cholesterolu LDL o 9% do 20%, przy znacznej zmienności zgłaszanej wśród osób.101112131415161718192021 wydaje się, że istnieje niewielka różnica w skuteczności estru kampestanolu i estru sitostanolu w odniesieniu do obniżania poziomu cholesterolu.23

wpływ tłuszczów zawierających ester sterolu/stanolu na obniżanie poziomu cholesterolu LDL jest stosunkowo spójny, niezależnie od tego, czy dieta podstawowa jest podobna do tej spożywanej obecnie w krajach zachodnich, czy też ma obniżoną zawartość tłuszczu całkowitego, tłuszczów nasyconych i cholesterolu, zgodnie z aktualnymi wytycznymi dla osób z hipercholesterolemią, oraz czy tłuszcze zawierające ester sterolu roślinnego zostały włączone do zwykłych produktów tłuszczowych lub produktów o obniżonej zawartości tłuszczu.89101112131415161718192021

w powyższych badaniach wykorzystano zarówno nienasycone (ester steroli), jak i nasycone (ester stanolowy) formy steroli roślinnych. Niedawno opisano badania porównawcze względnej skuteczności tych 2 preparatów w margarynie o zwykłej zawartości tłuszczu.1521 nałożenie na dietę podstawową o wysokiej zawartości tłuszczu całkowitego i nasyconego, ≈2 do 3 G / d pobrane w dwóch podzielonych dawkach estru sitostanolu i estru sitosterolu w margarynie spowodowało 10-13% zmniejszenie poziomu cholesterolu LDL i brak znaczących zmian poziomu cholesterolu HDL. W dodatkowym badaniu porównano wpływ 2 margaryn o obniżonej zawartości tłuszczu (40% tłuszczu) zawierających estry stanolu, estry steroli pochodzące z oleju talowego lub oleju sojowego, w kontekście diety zgodnej z kryteriami diety American Heart Association Step 2.Skuteczność obu preparatów była podobna, ze zmniejszeniem stężenia cholesterolu LDL o ≈9%.

mechanizmy działania tłuszczów zawierających estry stanolu roślinnego/sterolu

badania równowagi Sterolowej sugerują, że obniżony poziom cholesterolu we krwi można przynajmniej częściowo przypisać hamowaniu wchłaniania cholesterolu.Hamowanie to przypisano wielu mechanizmom, w tym podziałowi w fazie micelarnej światła jelita, obecności w nieuszkodzonej warstwie wody lub innych barierach śluzowych, które mogą ograniczać transport przezbłonowy, oraz zmianie tempa estryfikacji cholesterolu w ścianie jelita.2526272829

sterole roślinne różnią się strukturalnie od cholesterolu grupą metylową lub etylową w łańcuchach bocznych i nie są syntetyzowane w organizmie człowieka. Te różnice strukturalne sprawiają, że są one minimalnie przyswajalne. Stężenie kampesterolu w surowicy i stabilny izotopowo znakowany cholesterol można wykorzystać do oszacowania skuteczności wchłaniania cholesterolu jelitowego u ludzi.272829 takie dane potwierdziły pierwotne obserwacje z badań równowagi steroli, że sterole pochodzenia roślinnego zmniejszają wchłanianie cholesterolu zarówno dietetycznego, jak i endogennego w jelitach. Spekulowano, że pełna wielkość zmniejszonego tempa wchłaniania cholesterolu (33% do 60%) nie jest realizowana w obniżonym poziomie cholesterolu LDL z powodu mechanizmów kompensacyjnych, które zwiększają tempo syntezy endogennego cholesterolu.89 spekulacje te zostały niedawno potwierdzone.Badania kinetyczne dotyczące Lipoprotein wiązały się ze znacznym spadkiem poziomu cholesterolu LDL ze zmniejszonym tempem wytwarzania LDL apoB, a nie ze zmianą ułamkowego tempa katabolicznego LDL apoB.Ogólny brak wpływu steroli pochodzenia roślinnego na poziom cholesterolu HDL odzwierciedlał się zasadniczo w braku zmian parametrów kinetycznych HDL apoA-I. 12

potencjalne ryzyko związane ze stosowaniem tłuszczów zawierających Ester Stanol roślinny/sterol

odnotowano kilka działań niepożądanych związanych z krótko–lub długoterminowym spożywaniem tłuszczów zawierających ester stanol roślinny/sterol. Niepokojące są jednak pewne obserwacje obniżonego poziomu alfa i beta-karotenu, α-tokoferolu i/lub likopenu w osoczu w wyniku spożywania żywności zawierającej zarówno estry stanolu, jak i estry steroli.16172324 ogólnie rzecz biorąc, z wyjątkiem beta-karotenu, zmniejsza się często równolegle ze spadkiem cholesterolu całkowitego i LDL. Jednak obecnie wydaje się rozsądne zalecić dodatkowe monitorowanie wpływu żywności zawierającej estry sterolu/stanolu pochodzenia roślinnego na poziomy składników odżywczych rozpuszczalnych w tłuszczach i zalecić określenie oceny biologicznego znaczenia obserwowanych zmian. Aktywność fosfatazy alkalicznej, aminotransferazy alaninowej, aminotransferazy asparaginianowej i aminotransferazy γ-glutaminianowej nie miała wpływu na spożycie steroli roślinnych w zalecanym zakresie.17 inne dane techniczne dotyczące oceny bezpieczeństwa są obecnie dostępne.31323334353637

poziomy steroli/stanoli roślinnych w osoczu nie były lub są minimalnie podwyższone po codziennym spożyciu żywności zawierającej estry sterolu/stanolu.12162324 jednak w populacji mogą być pewne osoby, które mają rażąco wysoką absorpcję steroli roślinnych. Na przykład, osoby homozygotyczne dla sitosterolemia absorbują znaczne ilości sitosterolu, z powstałą hipercholesterolemią i rozwojem ksantomów.Nie wiadomo, czy niektóre osoby heterozygotyczne w tym stanie mogłyby wchłonąć większe ilości steroli roślinnych niż normalna populacja i czy prowadziłoby to do negatywnych skutków. W badaniu z udziałem 26 heterozygotów na sitosterolemię, 39 zwiększoną absorpcję sitosterolu zrównoważono zwiększoną eliminacją steroli roślinnych. Nie wiadomo, jaki procent osobników w danej populacji miałby ten stan. Mimo to, w przypadku braku większej ilości danych na temat mutacji genetycznych związanych z sitosterolemią, rozsądne byłoby doradzanie tym osobom przed stosowaniem tych pokarmów w chwili obecnej.

niepokojące są potencjalne niekorzystne skutki obniżenia beta-karotenu i być może innych witamin rozpuszczalnych w tłuszczach przez długi okres czasu u dzieci, które spożywałyby tłuszcze zawierające sterole roślinne. Podobnie brakuje danych na temat wpływu tych związków na kobiety w ciąży. Ponieważ produkty spożywcze zawierające sterole roślinne mogą być dzielone podczas posiłków przez wszystkich członków rodziny, potencjał spożycia przez osoby niehypercholesterolemiczne jest znaczny. W związku z tym American Heart Association zaleca dalsze badania i monitorowanie na dużą skalę w celu określenia długoterminowego bezpieczeństwa żywności zawierającej estry sterolu roślinnego/stanolu zarówno u dorosłych normocholesterolemicznych, jak i hipercholesterolemicznych, a także u dzieci.

kto powinien stosować tłuszcze zawierające estry Stanol/Sterol?

dopóki nie zostaną przeprowadzone długoterminowe badania w celu zapewnienia braku niekorzystnych skutków u wszystkich osób spożywających estry steroli roślinnych, produkty te powinny być zarezerwowane dla osób dorosłych wymagających obniżenia poziomu cholesterolu całkowitego i LDL z powodu hipercholesterolemii lub potrzeby wtórnej profilaktyki po zdarzeniu miażdżycowym. Chociaż można rozważyć ich zastosowanie jako uzupełnienie diety u dzieci z umiarkowaną lub ciężką hipercholesterolemią, należy monitorować stan witamin rozpuszczalnych w tłuszczach i ponownie wymagane są długoterminowe badania dotyczące bezpieczeństwa. Czy sterole roślinne powinny być stosowane u osób normocholesterolemicznych z innymi czynnikami ryzyka choroby niedokrwiennej serca (np. niski poziom cholesterolu HDL) pozostaje do ustalenia. Zasugerowano, że wprowadzenie steroli roślinnych do żywności (np. przez wzbogacanie margaryn i olejów spożywczych) może obniżyć ryzyko choroby wieńcowej dla całej populacji.Należy jednak wziąć pod uwagę nadmierne koszty tego środka, a także dane dotyczące skuteczności i bezpieczeństwa stosowania w populacji. Tak więc, chociaż pokarmy zawierające sterole roślinne są obiecującym dodatkiem do interwencji dietetycznych mających na celu poprawę profili ryzyka sercowego, wymagane jest więcej informacji, zanim ich rutynowe spożycie jest zalecane w populacji ogólnej jako krok w kierunku dietetycznego zapobiegania chorobie wieńcowej.

oświadczenie to zostało zatwierdzone przez Komitet Naukowy American Heart Association Science Advisory and Coordinating Committee w listopadzie 2000 roku. Jeden przedruk jest dostępny pod numerem telefonu 800-242-8721 (tylko w USA) lub pisząc American Heart Association, Public Information, 7272 Greenville Ave, Dallas, TX 75231-4596. Zapytaj o przedruk nr 71-0201.

  • 1 Pollak OJ. Skuteczne zapobieganie eksperymentalnej hipercholesterolemii i miażdżycy cholesterolu u królika. Krążenie.1953; 2:696–701.Google Scholar
  • 2 Pollak OJ. Obniżenie poziomu cholesterolu we krwi u człowieka. Krążenie.1953; 2:702–706.Google Scholar
  • 3 Best MM, Duncan CH, Van Loon OJ, et al. Wpływ sitosterolu na stężenie lipidów w surowicy. Am J Med.1955; 19:61–70.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 4 Farquhar JW, Smith RE, Dempsey ME. Wpływ beta sitosterolu na stężenie lipidów w surowicy młodych mężczyzn z miażdżycową chorobą serca. Krążenie.1956; 14:77–82.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 5 Riley FP, Steiner A. Wpływ sitosterolu na stężenie lipidów w surowicy u pacjentów z miażdżycą naczyń wieńcowych. Krążenie.1957; 16:723–729.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 6 Farquhar JW, Sokolow M. odpowiedź lipidów w surowicy i lipoprotein człowieka na beta-sitosterol i olej szafranowy: badanie długoterminowe. Krążenie.1958; 17:890–899.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 7 Lees AM, Mok HYI, Lees RS, et al. Sterole roślinne jako środki obniżające poziom cholesterolu: badania kliniczne u pacjentów z hipercholesterolemią i badania nad równowagą sterolu. Miażdżyca.1977; 28:325–338.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 8 Vanhanen HT, Blomqvist S, Ehnholm C, et al. Cholesterol w surowicy, cholesterol, prekursory i sterole roślinne u osób hipercholesterolemicznych o różnych fenotypach apo e podczas leczenia estrem sitostanolu w diecie. J. Res. 1993; 34:1535-1544.MedlineGoogle Scholar
  • 9 Miettinen TA, Vanhanen H. sitostanol w diecie związany z wchłanianiem, syntezą i poziomem cholesterolu w surowicy krwi w różnych fenotypach apolipoproteiny E. Miażdżyca.1994; 105:217–226.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 10 Blomqvist SM, Jauhiainen m, van Tol A, et al. Wpływ estru sitostanolu na skład i rozkład wielkości lipoprotein o niskiej i wysokiej gęstości. Nutr Metab Cardiovasc Dis.1993; 3:158–164.Google Scholar
  • 11 Vanhanen HT, Kajander J, Lehtovirta h, et al. Stężenie w surowicy krwi, skuteczność wchłaniania, wydalanie z kałem i synteza cholesterolu podczas zwiększania dawek dietetycznych estrów sitostanolu u osób z hipercholesterolemią. Clin Sci.1994; 87:61–67.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 12 Gylling H, Miettinen TA. Stężenie cholesterolu w surowicy oraz metabolizm cholesterolu i lipoprotein u pacjentów z HIPERCHOLESTEROLEMICZNĄ NIDDM przed i podczas leczenia estrem sitostanolu i margaryną. Diabetologia.1994; 37:773–780.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 13 Miettinen TA, Puska P, Gylling h, et al. Zmniejszenie stężenia cholesterolu w surowicy za pomocą margaryny sitostanol-ester w populacji lekko hipercholesterolemicznej. N Engl J Med.1995; 333:1308–1312.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 14 Gylling H, Radhakrishnan R, Miettinen TA. Zmniejszenie stężenia cholesterolu w surowicy u kobiet po menopauzie z przebytym zawałem mięśnia sercowego i zespołem złego wchłaniania cholesterolu wywołanym dietą estru sitostanolu: kobiety i dieta sitostanolu. Krążenie.1997; 96:4226–4231.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 15 Hallikainen MA, SARKKINEN ES, Erkkila AT, et al. Porównanie wpływu estrów steroli roślinnych i margaryn wzbogaconych w estry stanolu roślinnego na obniżenie stężenia cholesterolu w surowicy u osób z hipercholesterolemią na diecie niskotłuszczowej. Eur J Clin Nutr.2000; 54:715–725.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 16 Gylling H, Puska P, Vartiainen e, et al. Sterole w surowicy podczas karmienia estrem stanolowym w populacji lekko hipercholesterolemicznej. J. Res. 1999; 40: 593-600.MedlineGoogle Scholar
  • 17 Hendriks HF, Weststrate JA, van Vliet T, et al. Spready wzbogacone o trzy różne poziomy steroli oleju roślinnego oraz stopień obniżenia poziomu cholesterolu u osób z normocholesterolemią i lekko hipercholesterolemią. Eur J Clin Nutr.1999; 53:319–327.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 18 Blair SN, Capuzzi DM, Gottlieb SO, et al. Stopniowa redukcja stężenia cholesterolu całkowitego w surowicy i cholesterolu lipoprotein o niskiej gęstości z dodatkiem estru stanolu roślinnego do terapii statynowej. Am J Cardiol.2000; 86:46–52.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 19 Hallakainen MA, SARKKINEN ES, UUSITUPA MI. Estry stanolu roślinnego wpływają na stężenie cholesterolu w surowicy hipercholesterolemii mężczyzn i kobiet w sposób zależny od dawki. J Nutr.2000; 130:767–776.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 20 Law M. roślinny sterol i stanol margaryny a zdrowie. Br Med J. 2000; 320: 861-864.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 21 Weststrate JA, Meijer GW. Margaryny wzbogacone w sterole roślinne i obniżenie stężenia cholesterolu całkowitego i LDL w osoczu u osób z normocholesterolemią i łagodną hipercholesterolemią. Eur J Clin Nutr.1998; 52:334–343.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 22 Gylling H, Siimes MA, Miettinen TA. Ester sitostanolu margaryna w dietetycznym leczeniu dzieci z rodzinną hipercholesterolemią. J. Res. 1995; 36:1807-1812.MedlineGoogle Scholar
  • 23 Gylling H, Miettinen TA. Redukcja cholesterolu przez różne mieszanki stanoli roślinnych i ze zmiennym spożyciem tłuszczu. Metabolizm.1999; 48:575–580.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 24 Hallikainen MA, Uusitupa MI. Wpływ 2 niskotłuszczowych margaryn zawierających Ester stanol na stężenie cholesterolu w surowicy w ramach diety niskotłuszczowej u pacjentów z hipercholesterolemią. Am J Clin Nutr.1999; 69:403–410.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 25 Vahouny GV, Kritchevsky D. sterole roślinne i morskie oraz metabolizm cholesterolu. Nutr Pharmacol. 1981;31–72.Google Scholar
  • 26 Field FJ, Mathur SN. Estryfikacja Beta-sitosterolu przez acylokoenzym jelitowy A: acylotransferaza cholesterolu (ACAT) i jej wpływ na estryfikację cholesterolu. J. Res. 1983; 24: 409-417.MedlineGoogle Scholar
  • 27 Normen L, Dutta P, Lia A, et al. Estry steroli sojowych i ester beta-sitostanolu jako inhibitory wchłaniania cholesterolu w ludzkim jelicie cienkim. Am J Clin Nutr.2000; 71:908–913.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 28 Miettinen TA, Tilvis RS, Kesaniemi YA. Surowicze sterole roślinne i prekursory cholesterolu odzwierciedlają wchłanianie i syntezę cholesterolu u ochotników z losowo wybranej męskiej populacji. Am J Epidemiol.1990; 131:20–31.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 29 Tilvis RS, Miettinen TA. Surowicze sterole roślinne i ich związek z wchłanianiem cholesterolu. Am J Clin Nutr.1986; 43:92–97.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 30 Jones PJ, Raeini-Sarjaz M, Ntanios FY, et al. Modulacja poziomu lipidów w osoczu i kinetyki cholesterolu przez fitosterol w porównaniu z estrami fitostanolu. J. Res. 2000; 41: 697-705.MedlineGoogle Scholar
  • 31 Baker VA, Hepburn PA, Kennedy SJ, et al. Safety evaluation of phytosterol esters, part 1: assessment of estrogencity using a combination of in vivo and in vitro assays. Food Chem Toxicol.1999; 37:13–22.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 32 Hepburn PA, Horner SA, Smith M. Safety evaluation of phytosterol esters, part 2: subchronic 90-day oral toxicity study on phytosterol esters: a novel functional food. Food Chem Toxicol.1999; 37:521–532.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 33 Ayesh R, Weststrate JA, Drewitt PN, et al. Ocena bezpieczeństwa estrów fitosteroli, część 5: zawartość krótkołańcuchowych kwasów tłuszczowych i mikroflory w kale, aktywność enzymów bakteryjnych w kale i żeńskie hormony płciowe w surowicy u zdrowych ochotników z normolipidemią spożywających kontrolowaną dietę z margaryną wzbogaconą w Ester fitosterolu lub bez. Food Chem Toxicol.1999; 37:1127–1138.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 34 Weststrate JA, Ayesh R, Bauer-Plank C, et al. Ocena bezpieczeństwa estrów fitosteroli, część 4: stężenia kwasów żółciowych i steroli obojętnych w kale u zdrowych ochotników normolipidowych spożywających kontrolowaną dietę z margaryną wzbogaconą w ester fitosteroli lub bez niej. Food Chem Toxicol.1999; 37:1063–1071.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 35 Whittaker MH, Frankos VH, Wolterbeek AP, et al. Badanie toksyczności reprodukcyjnej dwóch generacji estrów stanolu roślinnego u szczurów. Regul Toxicol Pharmacol.1999; 29:196–204.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 36 Turnbull D, Frankos VH, Leeman WR, et al. Krótkoterminowe badania potencjału estrogenowego stanoli roślinnych i estrów stanoli roślinnych. Regul Toxicol Pharmacol.1999; 29:211–215.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 37 Turnbull D, Whittaker MH, Frankos VH, et al. 13-tygodniowe badanie toksyczności doustnej estrów stanolu u szczurów. Regul Toxicol Pharmacol.1999; 29:216–226.CrossrefMedlineGoogle Scholar
  • 38 Belamarich PF, Salen G, Starc TJ, et al. Odpowiedź na dietę i cholestyraminę u pacjentów z sitosterolemią. Pediatria.1990; 86:977–981.MedlineGoogle Scholar
  • 39 Salen G, Tint GS, Shefer S, et al. Increased sitosterol absorption is offset by rapid elimination to prevent accumulation in heterozygotes with sitosterolemia. Arterioscler Thromb.1992; 12:563–568. CrossrefMedlineGoogle Scholar

Related Posts

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany. Wymagane pola są oznaczone *