spectrofotometrie, tak van spectroscopie die zich bezighoudt met het meten van de stralingsenergie die door een lichaam wordt overgedragen of gereflecteerd als functie van de golflengte. Gewoonlijk wordt de intensiteit van de uitgezonden energie vergeleken met die van een ander systeem dat als standaard dient. Verschillende soorten moderne spectrofotometers bestrijken grote bereiken van het elektromagnetische spectrum: X-ray, ultraviolet, zichtbaar, infrarood of magnetron.
twee wetten drukken het verband uit tussen de absorptie van stralingsenergie en het absorberende medium. Volgens Bouguer ’s (of Lambert’ s) wet, absorbeert elke laag van gelijke dikte van het medium een gelijke fractie van de energie die het doorkruist. Volgens de wet van bier is het absorptievermogen van een opgeloste stof recht evenredig met de concentratie ervan in een oplossing.
ultraviolette spectrofotometrie is bijzonder nuttig voor het opsporen van kleurloze stoffen in oplossing en het meten van de concentratie ervan. De infrarode spectrofotometrie wordt het meest meestal gebruikt in het bestuderen van de moleculaire structuren van complexe organische samenstellingen.