amint azt a Speciációban láttuk, a fajok meghatározásának fő tényezője a reproduktív izoláció, a más csoportokkal való keresztezés hiánya vagy a reproduktív izoláció. Ez a döntő lépés sokféle módon történhet. Némelyik olyan drámai, mint a hegyláncok, amelyek a populációk között nőnek fel, mások pedig olyan finomak, mint az ivarsejtek kémiai inkompatibilitása.

a reprodukciós izolációnak két fő kategóriája van: a prezygotic és a postzygotic. A prezigotikus izoláció a zigóta kialakulása előtt következik be. A legtöbb esetben a párzás nem is fordul elő. A prezigotikus izoláció formái közé tartozik a térbeli, viselkedési, mechanikai és időbeli elszigeteltség. A posztzigotikus izoláció akkor következik be, amikor két különböző faj tagjai párosodtak és zigót hoztak létre. Az ilyen párzás utódait hibridnek nevezik. A hibridek gyakran nem képesek reprodukálni magukat, így a hibrid termelését nem tekintik sikeres párzásnak. A hibrideket megakadályozzák olyan fejlődési rendellenességek reprodukálásában, amelyek megakadályozzák őket a Szexuális érettségtől, a betegségtől, amely a legtöbb halálát okozza a szexuális érettség elérése előtt, vagy sterilitás.