Acinetobacter baumannii es un patógeno oportunista relevante y uno de los principales microorganismos responsables de brotes en infecciones nosocomiales en todo el mundo. Su patogenicidad se debe principalmente a su resistencia a múltiples antibióticos y a su capacidad para formar biopelículas en superficies abióticas. El objetivo de este estudio fue caracterizar el ciclo de formación de biopelículas de A. baumannii aislado de un paciente en un hospital y comparar su resistencia a los antibióticos con las células planctónicas. Para estudiar la formación de biopelículas, se utilizó el ensayo clásico de microtitulación, con tinción violeta cristalina y lectura de densidad óptica para clasificar el tipo de biopelícula. Además, se estudió el efecto de la gentamicina y la colistina sobre el biofilm bacteriano con un paso adicional de adición de antibióticos. Para la caracterización de las diferentes etapas de formación del biofilm, la cepa se cultivó en un cubreobjetos, y la tinción se realizó con una mezcla de marcadores de fluoróforos para visualizar el biofilm con un microscopio láser confocal. Fue posible diferenciar las etapas de formación de biopelículas de A. baumannii. A través de estas observaciones, fue posible estimar el tiempo transcurrido entre cada etapa. Como la cepa era susceptible a la colistina y a la gentamicina, ambos antibióticos se evaluaron después de la formación de la biopelícula. Ninguno de los antibióticos mostró un efecto en la erradicación de la biopelícula de A. baumannii.