în timpul anilor de lucru ca medic Michaelis și un prieten (Peter Rona) a construit un laborator compact, în spital, și pe parcursul a cinci ani – Michaelis a devenit publicat cu succes de peste 100 de ori. În timpul cercetărilor sale în spital, el a fost primul care a văzut diferitele tipuri de inhibiție; folosind în mod specific fructoza și glucoza ca inhibitori ai activității maltazei. Maltaza descompune maltoza în două unități de glucoză sau fructoză. Constatările din acel experiment au permis divergența inhibiției necompetitive și competitive. Inhibarea necompetitivă afectează valoarea kcat (dar nu și Km) pe un grafic dat; acest inhibitor se leagă de un sit care are specificitate pentru o anumită moleculă. Michaelis a stabilit că atunci când inhibitorul este legat, enzima va deveni inactivată.

ca mulți alți oameni de știință din vremea lor, Leonor Michaelis și Maud Menten au lucrat la o reacție care a fost folosită pentru a schimba conformația zaharozei și a o face Liza în două produse – fructoză și glucoză. Enzima implicată în această reacție se numește invertază și este enzima a cărei cinetică a fost susținută de Michaelis și Menten pentru a fi revoluționară pentru cinetica altor enzime. În timp ce exprimau viteza reacției studiate, au derivat o ecuație care descria viteza într-un mod care sugera că aceasta depinde în mare parte de concentrația enzimei, precum și de prezența substratului, dar numai într-o anumită măsură.

Adrian Brown și Victor Henri au pus bazele descoperirilor în cinetica enzimatică pentru care Michaelis și Menten sunt cunoscuți. Brown a imaginat teoretic mecanismul acceptat acum pentru cinetica enzimatică, dar nu avea datele cantitative pentru a face o afirmație. Victor Henri a adus contribuții semnificative la cinetica enzimatică în timpul tezei sale de doctorat, însă nu a remarcat importanța concentrației ionilor de hidrogen și a mutarotării glucozei. Scopul tezei lui Henri a fost de a compara cunoștințele sale despre reacțiile catalizate de enzime cu legile recunoscute ale chimiei fizice. Henri este creditat că a fost primul care a scris ecuația care este acum cunoscută sub numele de ecuația Michaelis-Menten. Folosind glucoza și fructoza în reacțiile catalitice controlate de maltază și invertază, Leonor Michaelis a fost primul om de știință care a distins diferitele tipuri de inhibiție prin utilizarea scalei pH care nu exista în timpul lui Henri.în special în timpul muncii lor de a descrie rata acestei reacții, au testat și extrapolat ideea unui alt om de știință, Victor Henri, că enzima pe care o foloseau avea o anumită afinitate pentru ambele produse ale acestei reacții – fructoza și glucoza. Folosind metodele lui Henri, Michaelis și Menten aproape au perfecționat acest concept de metodă cu rată inițială pentru experimentele la starea de echilibru. Ei studiau inhibarea când au descoperit că inhibarea necompetitivă (mixtă) se caracterizează prin efectul său asupra kcat (rata catalizatorului), în timp ce competitivitatea se caracterizează prin efectul său asupra vitezei (V). În experimentele Michaelis și Menten s-au concentrat puternic pe efectele pH-ului invertazei folosind ioni de hidrogen. Invertaza este o enzimă care se găsește în drojdia extracelulară și reacțiile catalizate prin hidroliză sau inversarea unei zaharoze (amestec de zaharoză și fructoză) la „zahăr invertit.”Principalul motiv pentru utilizarea invertazei a fost că ar putea fi ușor de testat și experimentele ar putea fi făcute într-un mod mai rapid. Zaharoza se rotește în polarimetru ca dextroratator-D, în timp ce zahărul invertit este levorotator-L. Acest lucru a făcut ca urmărirea inversării zahărului să fie relativ simplă. Ei au descoperit, de asemenea, că glucoza-D-glucoză este eliberată în reacții catalizate de invertază, care este foarte instabilă și se schimbă spontan în glucoză-D-glucoză. Deși, acestea sunt ambele în forma dextroratatorie, aici au observat că glucoza se poate schimba spontan, cunoscută și sub numele de mutarotare. Eșecul de a lua în considerare acest lucru a fost unul dintre principalele motive pentru care experimentele lui Henri au eșuat. Folosind invertaza pentru a cataliza inversiunea zaharozei, au putut vedea cât de repede reacționează enzima prin polarimetrie; prin urmare, s-a constatat că inhibarea necompetitivă apare în reacția în care zaharoza a fost inversată cu invertază.