Resumo

a ingestão de Álcool altera a secreção de melatonina, tanto em voluntários saudáveis e em alcoólicos em uma variedade de situações diferentes (ao beber, durante ou após a sua retirada, e com complicações neurológicas). Esta alteração pode reduzir a secreção ou afectar o seu ritmo circadiano, causando assim a secreção diurna em alguns alcoólicos. Procurámos determinar se a secreção de melatonina diurna é causada directamente pelo consumo agudo de álcool ou se, em vez disso, indica uma alteração na sincronização circadiana. Como o consumo de álcool como ocorre em alcoólicos (consumo contínuo de grandes quantidades) nunca foi examinado em voluntários saudáveis, expusemos 11 voluntários saudáveis a 256 g de álcool em mais de 24 horas para estudar os perfis circadianos de secreção de melatonina. Nossos resultados demonstram uma falta de secreção diurna em nossos sujeitos. Isto sugere que a secreção desordenada de melatonina circadiana observada nos alcoólicos indica uma mudança na secreção de melatonina ao invés de um efeito agudo do álcool sobre esta secreção, ou alternativamente, que é um efeito direto da exposição crônica ao invés de aguda a níveis elevados de álcool no sangue.

(recebido em 4 de janeiro de 2006; primeira revisão notificada em 14 de fevereiro de 2006; revisto em 24 de Março de 2006; aceite em 30 de Março de 2006)

introdução

a perturbação dos ritmos circadianos (Danel et al., 2001) pode explicar em parte algumas perturbações mentais secundárias ao consumo de álcool. O exame desta hipótese requer um estudo das alterações na secreção de melatonina que podem ser devidas ao consumo de álcool.os estudos de consumo de melatonina e álcool em voluntários saudáveis e em consumidores crónicos dependentes do álcool em diferentes situações (revisão em Danel e Touitou, 2004) revelaram dois resultados primários. O primeiro é que o consumo de álcool agudo e crónico inibem a secreção de melatonina. Estudos experimentais em voluntários saudáveis (Ekman et al., 1993; Rojdmark et al., 1993), na população em geral (Stevens et al., 2000), e em indivíduos dependentes do álcool na população em geral (Touitou et al., 1985; Wetterberg et al., 1992), tal como os estudos realizados durante o tratamento de indivíduos dependentes do álcool, tanto durante a abstinência (Schmitz et al., 1996) and with Wernicke’s syndrome (Wikner et al., 1995).o segundo grande achado é que o ritmo nyctemeral da secreção de melatonina é interrompido em alguns indivíduos dependentes do álcool. A melatonina é normalmente secretada apenas à noite, mas a secreção Diurna foi observada durante as primeiras 24 horas de abstinência ou quando ocorre intoxicação alcoólica contínua em indivíduos dependentes do álcool (Majumdar e Miles, 1987; Murialdo et al., 1991; Fonzi et al., 1992, 1994; Mukai et al., 1998). Não é claro, no entanto, se a secreção diurna da hormona é causada diretamente pelo consumo agudo de álcool ou, em vez disso, indica uma mudança na sincronização circadiana do Alcoólico. Os estudos realizados em voluntários saudáveis podem responder a esta pergunta, mas tais estudos não são notificados. Os ensaios entre voluntários saudáveis envolveram geralmente a administração aguda de álcool a uma hora do dia (à noite) e em quantidades (de 10 a 100 g) geralmente associadas ao consumo social (Ekman et al., 1993; Rojdmark et al., 1993; Stevens et al., 2000). O consumo de álcool em bebedores pesados, por outro lado, muitas vezes ocorre ao longo de uma porção muito mais longa do dia e envolve quantidades mais elevadas. Para aumentar a nossa compreensão da acção do álcool na secreção de melatonina e, em particular, para determinar se o álcool aumenta a secreção de melatonina durante o dia, realizámos um estudo de cruzamento cego durante um período de 26 horas (circadiano). Numa sessão, o álcool foi administrado regular e repetidamente e, na outra, foi administrado um placebo. Voluntários saudáveis, assim, atuaram como seus próprios controles, e nós controlamos para mascarar efeitos em ambas as sessões. A dose total administrada representava uma quantidade geralmente consumida diariamente por indivíduos alcoólicos, ou seja, 256 g por dia (equivalente a ∼2.5 L de vinho de 12%, 700 ml de whisky de 40% ou 6 L de cerveja de 4,5%) administrados a intervalos regulares durante toda a sessão. As secreções séricas de melatonina foram medidas ao longo do ciclo circadiano em 29 pontos temporais da sessão de consumo de álcool de 26 h e da sessão de controlo de 26 h.11 voluntários saudáveis do sexo masculino entre os 18 e os 30 anos (23, 3 + 2, 9 anos) foram incluídos após terem dado o seu consentimento por escrito. Nenhum tinha um diagnóstico atual ou passado de álcool, tabaco, ou outro abuso de substâncias ou dependência. Nenhum sujeito estava tomando medicação ou trabalhando turnos rotativos, e nenhum voou em voos transmeridianos nos últimos 2 meses. Todos foram sincronizados com a atividade diurna e o descanso noturno. Nenhum deles tinha um diagnóstico actual de fase tardia ou avançada ou síndrome hipernictemeral. As pontuações de Horne e Ostberg (1976) variaram entre 39 e 59 (média 49, 5 + 6, 8). Este critério excluía os indivíduos que eram claramente do tipo “manhã” ou “noite”. Nenhum indivíduo tinha antecedentes actuais ou passados de perturbação depressiva ou psicose. A escala de avaliação da depressão de Montgomery e Asberg (1979), por serem menores de 18 anos, excluiu qualquer transtorno depressivo atual. Os indivíduos não tinham anomalias físicas no momento do exame e não tinham tido qualquer infecção ou outra doença durante pelo menos 1 mês antes das sessões. Os índices de massa corporal variaram entre 20 e 25. As contagens sanguíneas de rotina e a química sanguínea estavam dentro dos limites normais, e os testes de VIH e hepatite B E C foram negativos.o estudo foi aprovado pelo Comitê de experimentação humana de Lille (França) e foi consistente com os padrões e princípios éticos para a pesquisa sobre ritmos biológicos em seres humanos (Touitou et al., 2004). O ritmo circadiano da melatonina foi estudado durante um estudo cruzado, em ocultação única, randomizado, que comparou uma sessão de álcool de 26 h com uma sessão de placebo de 26 h. Durante a sessão de álcool, 256 g de etanol foram administrados entre as 10:00 do dia 1 e 12:00 do dia 2 (Tabela 1) para produzir e manter as concentrações de álcool no sangue (BAC) entre 0, 5 e 0.7 g / l durante toda a sessão. Para obter um BAC significativo no início do período de recolha de Dados (12:00), 20 g de etanol, misturado com sumo de fruta, foi administrado oralmente às 10:00, 11:00 e 12:00; seguido de 10 g/h das 13:00 às 21:00 e das 07:00 às 11:00 do segundo dia. O sumo de fruta foi administrado isoladamente durante a sessão de placebo. Além disso, 7 g / h de álcool (Curetil*, AJC Pharma, Chateauneuf, França) em solução salina foi administrado por via intravenosa durante a noite (entre as 22h00 e as 06h00).:00) durante a sessão de álcool, e solução salina apenas na sessão de controle, para permitir que os sujeitos a dormir e manter um BAC suficiente. Todas as sessões tiveram lugar entre novembro e abril. As sessões para cada assunto tinham entre 2 e 5 semanas de intervalo. Os sujeitos foram admitidos no centro de Investigação Clínica às 08: 00. Durante o período de observação das 10:00 do dia 1 às 15:00 do dia 2 permaneceram na cama, lendo e assistindo televisão. Eles comeram refeições padronizadas às 08: 00, 12: 00, e 19:00 no dia 1 e às 08:00 e 12:00 no dia 2. Saíram do centro às 15:00 do dia 2. As luzes foram apagadas entre as 22:00 e as 06:00. Amostras de sangue foram coletadas para medir BAC em 5 pontos de tempo (12:00, 18:00, 24:00, 06:00, e 12:00) e concentrações de melatonina em 29 de pontos de tempo (12:00, 15:00, 18:00 e, em seguida, a cada 30 min entre 18:00 e 04:00, 05:00, 06:00, 07:00, 08:00, 11:00, 15:00). Durante as coleções de sangue entre 22: 00 e 06:00, o quarto foi iluminado com luz a uma intensidade média de 50 lux. as concentrações de melatonina foram medidas com um ensaio de imunoabsorção enzimática comercial (ELISA) (Boeringer Mannheim, França) num analisador totalmente automatizado (ES 700). Para evitar a variabilidade analítica inter-doseamento, todos os ensaios foram realizados num único lote grande no final do protocolo. Todas as amostras foram congeladas a -20°C até ao ensaio. Os coeficientes de variação Intra-ensaio para a melatonina (65 pg/ml) foram de 6, 1%.

análise estatística

usámos ANOVA com modelos lineares mistos para comparações emparelhadas para estudar as diferenças entre as curvas médias em duas condições (álcool, sem álcool). Os efeitos fixos foram condição (2 níveis), Tempo (29 níveis) e interação tempo–condição. O efeito sujeito foi considerado Aleatório, e escolhemos um padrão de covariância autoregressiva de primeira ordem para levar em conta a dependência entre medições repetidas. Este modelo foi escolhido de acordo com critérios da AIC (Akaike, 1974). Comparações das diferenças em cada ponto de tempo utilizaram uma correção Bonferroni. Um valor P < 0, 002 foi, portanto, considerado significativo.

resultados

concentrações de álcool no sangue

melatonina. A análise por grupos (Figura 1)

as curvas de melatonina durante as sessões sem álcool e álcool eram quase idênticas. Enquanto a curva durante a sessão de álcool tendeu a mostrar um atraso no início da melatoninsecreção em comparação com a sessão sem álcool, a análise dos dados não mostrou efeito estatisticamente significativo do álcool na secreção de melatonina (P = 0, 45). O valor médio do Pico de secreção foi 128 pg/ml ±68 na sessão sem álcool e 120 pg/ml ±57 na sessão com álcool. A secreção média de melatonina durante 24 h foi de 50, 8 pg / ml ±27 e 45 pg / ml ±20, respectivamente. Fig. 1.

discussão

os nossos dados mostram claramente que todos os indivíduos neste estudo segregaram melatonina apenas à noite. Foi observada secreção de melatonina circadiana em ambas as sessões, com secreção nocturna e sem melatonina circulante durante o dia.assim, os nossos resultados lançam uma nova luz sobre as observações na literatura sobre a secreção de melatonina Diurna nos alcoólicos.Majumdar e Miles (1987) foram os primeiros a comunicar perturbações no tempo da secreção de melatonina em doentes dependentes do álcool. Estes autores examinaram a secreção de melatonina durante a tarde em 28 pacientes do sexo masculino dependentes do álcool, todos os quais tinham consumido mais de 100 g/d de álcool por mais de 7 anos. A melatonina foi detectável (concentrações<5 ng/l) em 13 indivíduos durante a tarde. Este artigo-chave que descreve a secreção de melatonina Diurna foi seguido por três publicações de uma equipe italiana. Dois casos relataram medições da melatonina em 10 doentes dependentes do álcool, primeiro durante o consumo de álcool e depois após 2 semanas de abstinência. Estas foram comparadas com medições em controles voluntários saudáveis com idade igualada (Murialdo et al., 1991; Fonzi et al., 1992). Os resultados mostraram que as concentrações urinárias de melatonina durante o consumo de álcool foram significativamente mais elevadas nos doentes dependentes do álcool do que nos controlos (316.2 ± 36 pmol / 24 h nos doentes e 147 ± 34 pmol / 24 h nos controlos). Esta diferença deveu-se principalmente aos elevados níveis urinários de melatonina na fracção Diurna. Inversamente, os dois grupos não diferiam significativamente para a fração de tempo noturno. A proporção de fracções noite/dia foi inferior a 1 em 6 dos 10 doentes e superior (geralmente muito maior) a 1 nos outros 4. Após 14 dias de abstinência, esta relação excedeu 1 em todos os doentes e indivíduos de controlo.

Fonzi et al. (1994) demonstrou em 10 indivíduos dependentes do álcool, antes e após a interrupção, que as concentrações séricas de melatonina foram mais elevadas durante o consumo de álcool do que após a descontinuação e superiores às dos indivíduos de controlo. Também relataram o desaparecimento do ritmo circadiano da secreção de melatonina durante a retirada aguda. Foram efectuadas observações semelhantes em dois doentes com delirium tremens (Mukai et al., 1998), para os quais as concentrações séricas de melatonina durante a noite e durante o dia foram equivalentes (amostras colhidas a cada 4 horas).os nossos resultados mostram claramente que o álcool não teve efeito na secreção da melatonina Diurna. Uma hipótese é, portanto, necessária para tentar explicar os relatos da literatura mostrando um atraso progressivo no pico de secreção que eventualmente leva à secreção Diurna. Embora os trabalhos anteriores indiquem que o álcool inibe a secreção de melatonina (Danel e Touitou, 2004), esta experiência não demonstra tal inibição. A ausência destes resultados pode estar relacionada com o nível de álcool no sangue. O nível a que o etanol pode inibir a secreção de melatonina permanece por determinar. Uma publicação recente (Kuhlwein et al., 2003) relata um atraso na secreção de melatonina de pacientes dependentes do álcool que tinham parado de beber muito recentemente, na mesma direção que observamos em 6 dos nossos 11 indivíduos. Este estudo, que procurou examinar as relações entre distúrbios do sono em doentes dependentes do álcool logo após a interrupção e as concentrações de melatonina e cortisol, observou um atraso no pico nocturno da melatonina em 11 doentes dependentes do álcool logo após a interrupção, em comparação com 10 controlos combinados com a idade. O atraso foi correlacionado com os períodos de latência do sono. No entanto, eles não testaram para a secreção diurna de melatonina.

Agora que temos mostrado que o álcool em si não causa diretamente dia a secreção de melatonina, podemos levantar a hipótese de que os distúrbios no momento em que a secreção de melatonina na literatura são devido a uma mudança no ritmo circadiano de secreção de melatonina e parecem indicar uma possível dessincronização interna durante a crônica, o consumo de álcool. O nível de etanol a que isso ocorre permanece a ser determinado. Outra possível explicação é que a secreção de melatonina Diurna observada nos alcoólicos é devido a níveis cronicamente elevados de álcool no sangue que causam secreção de melatonina Diurna através de mecanismos que não têm nada a ver com o tempo circadiano. Em tal caso, a secreção diurna de melatonina observada em alcoólicos seria uma causa e não uma consequência da dessincronização.apoiado pelo Institut national de la Santé et de la Recherche médicale e pelo Centre Régional et Universitaire de Lille.

Autor observa

1service d’addictologie, Centre Hospitalier Universitaire, Lille 59037 Lille Cedex, França

2Service de Biochimie médicale et de Biologie moléculaire, Faculté de Médecine Pitié Salpêtrière 75013 Paris, França