durante seus anos trabalhando como médico Michaelis e um amigo (Peter Rona) construiu um laboratório compacto, no hospital, e ao longo de cinco anos – Michaelis foi publicado com sucesso mais de 100 vezes. Durante sua pesquisa no hospital, ele foi o primeiro a ver os diferentes tipos de inibição; especificamente usando frutose e glicose como inibidores da atividade da maltase. Maltase quebra maltose em duas unidades de glicose ou frutose. As conclusões dessa experiência permitiram a divergência entre a inibição não competitiva e a inibição competitiva. A inibição não-competitiva afeta o valor do kcat (mas não o Km) em um dado grafo; este inibidor se liga a um local que tem especificidade para a determinada molécula. Michaelis determinou que quando o inibidor é ligado, a enzima seria desativada.como muitos outros cientistas de seu tempo, Leonor Michaelis e Maud Menten trabalharam em uma reação que foi usada para mudar a conformação da sacarose e torná – la LSA em dois produtos-frutose e glicose. A enzima envolvida nesta reação é chamada invertase, e é a enzima cuja cinética tem sido apoiada por Michaelis e Menten para ser revolucionária para a cinética de outras enzimas. Embora expressando a taxa da reação estudada, eles derivaram uma equação que descreveu a taxa de uma forma que sugere que ela é principalmente dependente da concentração enzimática, bem como da presença do substrato, mas apenas em certa medida.Adrian Brown e Victor Henri prepararam as bases para as descobertas da cinética enzimática que Michaelis e Menten são conhecidos. Brown teoricamente imaginou o mecanismo agora aceito para cinética enzimática, mas não tinha os dados quantitativos para fazer uma alegação. Victor Henri fez contribuições significativas para a cinética enzimática durante sua tese de doutorado, no entanto, ele não observou a importância da concentração de íons de hidrogênio e mutarotação da glicose. O objetivo da tese de Henri era comparar seu conhecimento de reações catalisadas por enzimas com as leis reconhecidas da química física. Henri é creditado como o primeiro a escrever a equação que agora é conhecida como equação de Michaelis-Menten. Usando glicose e frutose nas reações catalíticas controladas por maltase e invertase, Leonor Michaelis foi o primeiro cientista a distinguir os diferentes tipos de inibição usando a escala de pH que não existia no tempo de Henri.

particularmente durante seu trabalho em descrever a taxa desta reação, eles também testaram e extrapolaram sobre a ideia de outro cientista, Victor Henri, que a enzima que eles estavam usando tinha alguma afinidade para ambos os produtos desta reação – frutose e glicose. Usando os métodos de Henri, Michaelis e Menten quase aperfeiçoaram este conceito de método de taxa inicial para experimentos em estado estacionário. Eles estavam estudando inibição quando descobriram que a inibição não-competitiva (mista) é caracterizada por seu efeito no kcat (taxa de catalisador), enquanto competitiva é caracterizada por seu efeito na velocidade (V). Nos experimentos Michaelis e Menten eles se concentraram fortemente nos efeitos de pH da invertase usando íons de hidrogênio. Invertase é uma enzima encontrada em leveduras extracelulares e reações catalisadas por hidrólise ou invertendo uma sacarose (mistura de sacarose e frutose) para “açúcar invertido”.”A principal razão para usar a invertase foi que ela poderia ser facilmente avaliada e experimentos poderiam ser feitos de maneira mais rápida. A sacarose gira em Polarímetro como dextroratatório-D enquanto o açúcar invertido é levorotatório-L. isto tornou o rastreamento da inversão do açúcar relativamente simples. Eles também descobriram que a α-D-glucose é libertada em reações catalisadas pela invertase, que é muito instável e espontaneamente muda para β-D-glucose. Embora ambos estejam na forma dextroratatória, é aqui que eles notaram que a glicose pode mudar espontaneamente, também conhecida como mutarotação. Não levar isso em consideração foi uma das principais razões pelas quais as experiências de Henri ficaram aquém. Usando a invertase para catalisar a inversão da sacarose, eles podiam ver quão rápido a enzima estava reagindo pela polarimetria; portanto, inibição não-competitiva foi encontrada para ocorrer na reação onde a sacarose foi invertida com a invertase.