podczas swoich lat pracy jako lekarz Michaelis i przyjaciel (Peter Rona) zbudowali kompaktowe laboratorium, w szpitalu, a w ciągu pięciu lat – Michaelis z powodzeniem został opublikowany ponad 100 razy. Podczas swoich badań w szpitalu, był pierwszym, który widział różne rodzaje hamowania; konkretnie przy użyciu fruktozy i glukozy jako inhibitorów aktywności maltazy. Maltaza rozbija maltozę na dwie jednostki glukozy lub fruktozy. Wyniki tego eksperymentu pozwoliły na dywergencję hamowania niekonkurencyjnego i konkurencyjnego. Niekonkurencyjne hamowanie wpływa na wartość kcat (ale nie Km) na dowolnym wykresie; inhibitor ten wiąże się z miejscem, które ma swoistość dla określonej cząsteczki. Michaelis ustalił, że po związaniu inhibitora enzym ulegnie inaktywacji.

podobnie jak wielu innych naukowców swoich czasów, Leonor Michaelis i Maud Menten pracowali nad reakcją, która została wykorzystana do zmiany konformacji sacharozy i uczynienia jej Lizą w dwa produkty – fruktozę i glukozę. Enzym biorący udział w tej reakcji nazywa się inwertazą i jest to enzym, którego Kinetyka została poparta przez Michaelisa i Mentena jako rewolucyjna dla kinetyki innych enzymów. Wyrażając szybkość badanej reakcji, uzyskali równanie opisujące szybkość w sposób sugerujący, że zależy ona głównie od stężenia enzymu, jak również od obecności substratu, ale tylko do pewnego stopnia.

Adrian Brown i Victor Henri położyli podwaliny pod odkrycia kinetyki enzymatycznej, z których znani są Michaelis i Menten. Brown teoretycznie przewidział mechanizm obecnie akceptowany dla kinetyki enzymatycznej, ale nie miał danych ilościowych, aby złożyć wniosek. Victor Henri wniósł znaczący wkład w kinetykę enzymów podczas pracy doktorskiej, nie zwracając jednak uwagi na znaczenie stężenia jonów wodorowych i mutarotacji glukozy. Celem pracy Henriego było porównanie jego wiedzy o reakcjach katalizowanych enzymami z uznanymi prawami Chemii Fizycznej. Henri jest uznawany za pierwszego, który napisał równanie, które jest obecnie znane jako równanie Michaelisa-Mentena. Wykorzystując glukozę i fruktozę w reakcjach katalitycznych kontrolowanych przez maltazę i inwertazę, Leonor Michaelis był pierwszym naukowcem, który rozróżnił różne rodzaje hamowania za pomocą skali pH, która nie istniała za czasów Henriego.

szczególnie podczas pracy nad opisem szybkości tej reakcji badali i ekstrapolowali na pomysł innego naukowca, Victora Henriego, że enzym, którego używali, ma pewne powinowactwo do obu produktów tej reakcji – fruktozy i glukozy. Korzystając z metod Henriego, Michaelis i Menten prawie udoskonalili tę koncepcję metody początkowej dla eksperymentów w stanie stacjonarnym. Badali hamowanie, gdy odkryli, że niekonkurencyjne (mieszane) hamowanie charakteryzuje się wpływem na kcat (szybkość katalizatora), podczas gdy konkurencyjny charakteryzuje się wpływem na prędkość (V). W eksperymentach Michaelisa i Mentena koncentrowali się głównie na Ph inwertazy z użyciem jonów wodorowych. Inwertaza jest enzymem występującym w drożdżach pozakomórkowych i katalizowanym reakcjami przez hydrolizę lub odwrócenie sacharozy (mieszaniny sacharozy i fruktozy) do ” cukru inwertowanego.”Głównym powodem stosowania inwertazy było to, że można ją łatwo badać i szybciej przeprowadzać eksperymenty. Sacharoza obraca się w polarymetrze jako dekstroratator-D, podczas gdy cukier inwertacyjny jest leworotatorowy-L. dzięki temu śledzenie inwersji cukru było stosunkowo proste. Odkryli również, że α-D-glukoza jest uwalniana w reakcjach katalizowanych przez inwertazę, która jest bardzo niestabilna i spontanicznie zmienia się w β-D-glukozę. Chociaż oba są w postaci dekstratacyjnej, to właśnie tam zauważyli, że glukoza może zmieniać się samoistnie, znany również jako mutarotacja. Nie wzięcie tego pod uwagę było jednym z głównych powodów, dla których eksperymenty Henriego nie powiodły się. Stosując inwertazę do katalizowania inwersji sacharozy, można było zobaczyć, jak szybko enzym reaguje za pomocą polarymetrii; w związku z tym stwierdzono, że w reakcji, w której sacharozę odwrócono inwertazą, występuje niekonkurencyjne hamowanie.