Spektrofotometria, spektroskopian haara, joka käsittelee kappaleen lähettämän tai heijastaman säteilyenergian mittaamista aallonpituuden funktiona. Tavallisesti lähetetyn energian intensiteettiä verrataan jonkin muun standardina toimivan järjestelmän lähettämään energiaan. Erityyppiset nykyaikaiset spektrofotometrit kattavat laajan sähkömagneettisen spektrin alueen: röntgen -, ultravioletti -, näkyvä -, infrapuna-tai mikroaaltosäteilyn.
Encyclopædia Britannica, Inc.
kaksi lakia ilmaisevat säteilyenergian absorption ja absorboivan väliaineen välisen suhteen. Bouguerin (tai Lambertin) lain mukaan jokainen väliaineen samanpaksuinen kerros absorboi yhtä suuren osan sitä läpäisevästä energiasta. Oluen lain mukaan liuenneen aineen absorptiokyky on suoraan verrannollinen sen pitoisuuteen liuoksessa.
Ultraviolettispektrofotometria on erityisen hyödyllinen liuoksessa olevien värittömien aineiden havaitsemisessa ja niiden pitoisuuden mittaamisessa. Infrapunaspektrofotometriaa käytetään yleisimmin monimutkaisten orgaanisten yhdisteiden molekyylirakenteiden tutkimiseen.