Spektrofotometrie, obor spektroskopie, která se zabývá měření zářivé energie vysílané nebo odrážené tělo jako funkce vlnové délky. Obvykle je intenzita přenášené energie porovnána s intenzitou přenášenou jiným systémem, který slouží jako standard. Různé typy moderních spektrofotometrů pokrývají široké rozsahy elektromagnetického spektra: rentgenové, ultrafialové, viditelné, infračervené nebo mikrovlnné.
Dva zákony, které vyjadřují vztah mezi absorpcí energie záření a absorbující střední. Podle Bouguer (nebo Lambert) zákona, každá vrstva stejné tloušťky média absorbuje stejné zlomek energie křížení. Podle zákona o pivu je absorpční kapacita rozpuštěné látky přímo úměrná její koncentraci v roztoku.
ultrafialová spektrofotometrie je zvláště užitečná při detekci bezbarvých látek v roztoku a měření jejich koncentrace. Infračervená spektrofotometrie se nejčastěji používá při studiu molekulárních struktur komplexních organických sloučenin.