Během let pracuje jako lékař Michaelis a přítelem (Peter Rona) postavil kompaktní laboratoř, v nemocnici, a v průběhu pěti let – Michaelis úspěšně se stal publikoval více než 100 krát. Během svého výzkumu v nemocnici, on byl první, aby zobrazení různých typů inhibice; konkrétně pomocí fruktózy a glukózy jako inhibitory maltáza činnosti. Maltáza rozkládá maltózu na dvě jednotky glukózy nebo fruktózy. Zjištění z tohoto experimentu umožnila divergenci nesoutěžní a konkurenční inhibice. Nekompetitivní inhibice ovlivňuje hodnotu kcat (ale ne Km) na daném grafu; tento inhibitor se váže na místo, které má specificitu pro určitou molekulu. Michaelis určil, že po navázání inhibitoru se enzym inaktivuje.

stejně Jako mnoho jiných vědců své doby, Leonor Michaelis a Maud Menten pracoval na reakci, který byl použit ke změně konformace sacharóza a aby to lyse do dvou produktů – fruktózy a glukózy. Enzym podílející se na této reakci se nazývá invertáza, a to je enzymová kinetika, které byly podporovány Michaelis a Menten být revoluční pro kinetika jiných enzymů. Zároveň vyjadřuje rychlost reakce studoval, jsou odvozena rovnice, která popisuje rychlost způsobem, který navrhl, že to je většinou závislé na enzymu, koncentraci, stejně jako na přítomnosti substrátu, ale pouze do určité míry.

Adrian Brown a Victor Henri položili základy pro objevy v kinetice enzymů, o kterých jsou Michaelis a Menten známí. Brown si teoreticky představoval mechanismus, který je nyní přijat pro kinetiku enzymů, ale neměl kvantitativní údaje, aby mohl uplatnit nárok. Victor Henri významně přispěl k enzymové kinetice během své disertační práce, ale postrádal zmínku o důležitosti koncentrace vodíkových iontů a mutarotace glukózy. Cílem Henriho práce bylo porovnat jeho znalosti enzymaticky katalyzovaných reakcí s uznávanými zákony fyzikální chemie. Henri je připočítán s tím, že jako první napsal rovnici, která je nyní známá jako Michaelis-Mentenova rovnice. Pomocí glukózy a fruktózy v katalytické reakce řízena maltáza a invertáza, Leonor Michaelis byl první vědec, aby rozlišovat různé typy inhibice pomocí stupnice pH, která neexistovala v Henri.

Zvláště během jejich práce na popisu, rychlost této reakce jsou také testovány a extrapolovat na myšlenku další vědec, Victor Henri,, že enzym, který používali měl nějakou afinitu pro oba produkty této reakce – fruktózy a glukózy. Pomocí Henriho metod Michaelis a Menten téměř zdokonalili tento koncept metody počáteční rychlosti pro experimenty v ustáleném stavu. Studovali inhibici, když zjistili, že nekompetitivní (smíšená) inhibice je charakterizována svým účinkem na kcat (rychlost katalyzátoru), zatímco konkurenční je charakterizována svým účinkem na rychlost (V). V experimentech Michaelis a Menten se intenzivně zaměřili na pH účinky invertázy pomocí vodíkových iontů. Invertáza je enzym nacházející se v extracelulárních kvasinkách a katalyzovaných reakcích hydrolýzou nebo invertací sacharózy (směsi sacharózy a fruktózy) na “ invertující cukr.“Hlavním důvodem pro použití invertázy byl, že by to mohlo být snadno testovány a experimentů by mohlo být provedeno v rychlejším způsobem. Sacharóza se otáčí v polarimetru jako dextroratatory-D vzhledem k tomu, invertní cukr je levotočivý-L To udělal sledování inverze cukru relativně jednoduché. Zjistili také, že α-D-glukóza se uvolňuje v reakcích katalyzovaných invertázou, která je velmi nestabilní a spontánně se mění na β-d-glukózu. Ačkoli jsou oba v dextroratační formě, zde poznamenali, že glukóza se může spontánně měnit, také známá jako mutarotace. Nebrat to v úvahu bylo jedním z hlavních důvodů, proč Henriho experimenty selhaly. Pomocí invertázy katalyzovat inverze sacharózy, mohli vidět, jak rychle enzym reaguje tím, polarimetry; a proto, non-kompetitivní inhibice bylo zjištěno, že se vyskytují v reakci, kde sacharózy byl převrácený s invertáza.